Page 143 - 《精细化工》2022年第11期
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第 11 期 宗 薇，等: 基于磷脂-嵌段共聚物杂化囊泡的药物载体 ·2293·
有时间点紫外吸光度的总和。 培养基、MTT 溶液、磷脂-嵌段共聚物杂化囊泡）；
1.2.5 细胞毒性的评价 A b 为空白组吸光度（含培养基、MTT 溶液）；A c 为
使用的人肾癌细胞 OS-RC-2 细胞培养液为含有 对照组吸光度（含人肾癌细胞 OS-RC-2、培养基、
体积分数为 10%胎牛血清的 DMEM 培养基，将处于 MTT 溶液）。
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对数生长期的细胞以 1×10 ~1×10 个/孔密度铺于 96 1.2.6 数据处理与分析
孔细胞培养板中，并置于恒温培养箱中培养 12 h， 所有实验数据均用“平均值±标准差”来表示，
设置恒温培养箱的参数为 37 ℃，气体环境为体积 统计学分析采用 t 检验，p＜0.05 表明结果具有显著
分数 95%空气和 5% CO 2 ，在空白组中加入同体积培 性差异，并用*表示。
养液，实验组中加入不同浓度的样品，每个实验组
2 结果与讨论
设定 3 个平行组，空白组和阴性对照组内加入培养
基，分别培养不同时间，当孵育结束后，移除培养 2.1 微米级磷脂-嵌段共聚物杂化囊泡组装与表征
孔中液体，向 96 孔板培养板的每个孔中加入 20 μL 标记红色荧光的 POPC 与嵌段共聚物 P3 按照质
含有质量浓度为 5 g/L MTT 的 PBS 溶液继续培养 量比为 7∶3 混合，在交流电场 5 V、10 Hz 条件下，
4 h，然后吸掉孔中的培养基，再加入 150 μL 二甲 制备微米级 A 17 磷脂-嵌段共聚物杂化囊泡，结果如
基亚砜（DMSO），在使用酶标仪测试前，轻轻振荡 图 1 所示。由图 1a 可见，绿色荧光为嵌段共聚物
样品管 3 min 充分溶解晶体，使用酶标仪在 570 nm P3 显示，其激发波长为 463 nm；图 1b 红色荧光为
波长下测试样品的吸光度。样品对细胞生长的抑制 POPC 膜轮廓，其激发波长为 595 nm；图 1c 为图
率按式（3）进行计算： 1a 和 b 叠加后效果图。由图 1 可知，POPC 分子和
A A 嵌段共聚物 P3 分子能够共同组装出尺寸为 20 μm 左
抑制率 / %= c s 100 （3）
A A b 右磷脂-嵌段共聚物杂化囊泡，且分子均匀分散于囊
c
式中：A s 为实验组吸光度（含人肾癌细胞 OS-RC-2、 泡膜表面。
a—嵌段共聚物 P3 膜层；b—POPC 膜层；c—图 a 和 b 叠加
图 1 样品的显微镜照片
Fig. 1 Microscopic images of samples
2.2 纳米级磷脂-嵌段共聚物杂化囊泡组装 DMAEMA 单元数量多。同样，当带有正电荷的
使用 DLS 对制备的纳米级磷脂-嵌段共聚物杂 POEPC 被加入到组装体中时，A 6 、A 7 和 A 8 可以成
化囊泡尺寸、PDI 和 Zeta 电位进行了测量，当直 功组装成囊泡，而 A 9 囊泡发生聚集。A 10 的 Zeta 电
径>300 nm 或 PDI>0.4，表明样品发生了聚集，被舍 位比 A 7 大，证明了磷脂-嵌段共聚物杂化囊泡中嵌
弃，结果如表 2 所示。由表 2 可知，由于共聚物带 段共聚物的成功加入。当带有负电荷的 POPS 被加
正电荷，导致磷脂-嵌段共聚物杂化囊泡中随着磷脂 入到杂化物中时，在含有嵌段共聚物 P1 条件下均未
含量所占比例的减少，杂化物的 Zeta 电位增大。A 3 能形成质量较好的组装体。在制备 A 14 组装体时，
可以成功组装，但对于 A 4 ，其在制备后的 2 h 内就 出现样品黏附玻璃表面现象，样品不能够顺利地从
会形成大块的聚集体，该现象的出现可能是因为磷 圆底烧瓶内部脱离到溶液中，只有 A 13 能制备出质
脂-嵌段共聚物杂化囊泡膜的不稳定性和相分离因 量较好的组装体。出现以上结果是由于嵌段共聚物
素导致膜上分子不受控地重排成磷脂-嵌段共聚物 和脂类含有相反的电荷。A 13 的 Zeta 电位为正值，
聚集体。A 3 比 A 1 具有更高的 Zeta 电位，该结果的 可能由该组装体中含有较高比例带正电荷嵌段共聚
出现暗示 A 3 中存在具有高相对分子质量亲水链的 物所引起。但 A 13 稳定性较差，样品保存 3 d 就会出
