Page 135 - 《精细化工》2022年第8期

第 8 期 乜世成，等: 超高压微射流技术提取对裸藻 β-葡聚糖结构和抗氧化活性的影响 ·1635·

1.2.4 Box-Behnken 响应面优化实验 溶液、FeSO 4 溶液（9 mmol/L）、H 2O 2 溶液（8.8 mmol/L）
根据单因素实验结果，采用响应面 Box-Behnken 和水杨酸-乙醇溶液（9 mmol/L）各 1 mL，37 ℃下
中心组合实验设计优化方案，以时间（A）、压力（B）、 避光反应 30 min 后，在 510 nm 处测定吸光度，按
料液比（C）、SDS 质量浓度（D）为因素，β-葡聚 式（5）计算•OH 的清除率：
糖提取率为指标，得到四因素三水平表见表 1。 A  i A  j 
R /%  1  A   100 （5）
表 1 响应面分析法的因素与水平表  0 
Table 1 Factors and levels of response surface methodology 式中：R 为•OH 的清除率，%； A 为样品溶液与 FeSO 4
i
因素 溶液、H 2 O 2 溶液和水杨酸-乙醇溶液吸光度； A 为
水平 j
A/s B/MPa C/(g∶mL) D/(g/L)
样品溶液与 FeSO 4 溶液、蒸馏水和水杨酸-乙醇溶液
–1 60 20 1∶200 2
0 90 30 1∶250 4 吸光度； A 为 DMSO 与 FeSO 4 溶液、H 2 O 2 溶液和
0
1 120 40 1∶300 6 水杨酸-乙醇溶液吸光度。

1.3 结构表征和性能测试 2 结果与讨论
1.3.1 三螺旋结构测定
配制 624 μmol/L 刚果红溶液，配制浓度分别为 2.1 单因素实验结果
0、0.05、0.10、0.15、0.20、0.30、0.40、0.50 mol/L 固定微射流压力为 30 MPa、料液比 1∶250、
的 NaOH 溶液和质量浓度为 1 g/L 的裸藻 β-葡聚糖 SDS 质量浓度为 4 g/L，考察微射流时间对 EBG 提
悬浮液（分别为 EBG 和 EBGS 悬浮液）。分别取 2 取率的影响，结果如图 1a 所示。
mL 不同浓度的 NaOH 溶液于比色管中，实验组分
别滴加 1 mL 质量浓度为 1 g/L 的 EBG 和 EBGS 悬
浮液。对照组滴加 1 mL 蒸馏水，然后分别加入刚果
红溶液 1 mL，28 ℃下作用 30 min [21] 。采用紫外-
可见分光光度计在 400~600 nm 进行扫描，并记录其
最大吸收波长。
1.3.2 结构表征
FTIR 测试：样品与 KBr 按质量比 1∶100 混合
–1
进行压片，在分辨率为 4 cm 、波数范围 4000~
–1
400 cm 条件下进行测试。XRD 测试：采用 Cu K α
射线，在 40 kV，30 mV 条件下对膜样品进行测试，
2θ=5°~80°。SEM 测试：用 SEM 对样品进行表面形
貌分析。
1.3.3 抗氧化活性测试
1.3.3.1 DPPH 自由基（DPPH•）清除能力的测定
按文愉熙等 [22] 的方法加以修改，分别配制质量
浓度为 4 g/L 的 EBG 与 EBGS 溶液备用，按照稀释
倍数（1、2、4、6、8、10）稀释至 0.40、0.50、0.67、
1.0、2.0、4.0 g/L，然后量取样品溶液与 DPPH-乙醇溶
液（0.2 mmol/mL）各 3 mL，静置反应 30 min，在 517
nm 处测定吸光度，按式（4）计算 DPPH•的清除率：
 A  A j 
i
R /%  1    100 （4）
 A 0 
式中：R 为 DPPH•的清除率，%；A i 为样品溶液与
DPPH-乙醇溶液吸光度；A j 为无水乙醇与 DPPH-乙
醇溶液吸光度；A 0 为 DMSO 与 DPPH-乙醇溶液吸光度。
1.3.3.2 OH 自由基（•OH）清除能力测定
按照 1.3.3.1 方法配制样品溶液，然后量取样品