Page 159 - 《精细化工)》2023年第10期
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第 10 期 张心驰,等: 梯度醇沉兰州百合多糖结构及降血糖活性分析 ·2237·
表 3 4 种多糖相对分子质量分布
Table 3 Relative molecular mass distribution of four polysaccharides
样品 保留时间/min 重均相对分子质量(M w)/Da 数均相对分子质量(M n)/Da 分散系数 M w/M n 峰面积占比/%
BLP-30-1 12.205~15.062 625443 491954 1.27 30.59
BLP-30-2 15.062~16.757 110251 94404 1.17 29.21
BLP-30-3 16.757~17.627 33542 31960 1.05 9.04
BLP-30-4 17.627~20.750 9719 6784 1.43 20.97
BLP-50-1 12.440~15.918 745023 549184 1.36 44.58
BLP-70-1 12.900~15.024 666708 590048 1.13 9.76
BLP-70-2 15.024~16.371 99143 93119 1.06 8.09
BLP-70-3 16.371~17.342 56500 55420 1.01 7.88
BLP-70-4 17.440~24.247 2449 1053 2.33 70.85
BLP-80-1 15.975~19.271 6340 8613 1.36 25.79
BLP-80-2 19.271~19.917 3699 3605 1.03 11.20
如图 3 和表 3 所示,由于未分离纯化,4 种多 BLP-30 对 α-淀粉酶的抑制率从 42.63%(0.0625 g/L)
糖均为混合多糖,多糖是由至少 10 个单糖所组成的 上升至 83.49%(4 g/L);BLP-50 对 α-淀粉酶的抑制
高分子聚合物,将相对分子质量小于 1.8 kDa 的峰 率从 6.38%(0.0625 g/L)上升至 76.62%(4 g/L);
忽略不计,BLP-30 由 4 种多糖峰组成,分别记为 BLP-70 对 α-淀粉酶的抑制率从 79.41%(0.0625 g/L)
BLP-30-1、BLP-30-2、BLP-30-3、BLP-30-4;BLP-50 上升至 98.35%(4 g/L);BLP-80 对 α-淀粉酶的抑制
由 1 种多糖峰组成,记为 BLP-50-1;BLP-70 由 4 率从 46.61%(0.0625 g/L)上升至 92.40%(4 g/L),
种多糖峰组成,分别记为 BLP-70-1、BLP-70-2、 4 种多糖在实验质量浓度范围内均对 α-淀粉酶具有
BLP-70-3、BLP-70-4;BLP-80 由 2 种多糖峰组成, 一定的抑制能力,且随着多糖质量浓度的增加,抑
制能力逐渐增强,其中 BLP-70 和 BLP-80 对 α-淀粉
分别记为 BLP-80-1、BLP-80-2。BLP-30 中主要以
酶的抑制能力较强,BLP-70 对 α-淀粉酶的抑制能力
相对分子质量为 625 kDa 的 BLP-30-1 为主,峰面积
均强于 BLP-30、BLP-50、BLP-80。从表 4 可以看
占比为 30.59%,多分散系数为 1.27。BLP-50、
出,4 种多糖中 BLP-30 和 BLP-50 对 α-淀粉酶的抑
BLP-70、BLP-80 中则主要以相对分子质量为 745
制能力均显著弱于阿卡波糖(P<0.05),BLP-70 和
kDa 的 BLP-50-1、相对分子质量为 2.45 kDa 的
BLP-80 对 α-葡萄糖苷酶的抑制能力均强于阿卡波
BLP-70-4、相对分子质量为 6.34 kDa 的 BLP-80-1
糖,且 BLP-70 对 α-淀粉酶的抑制能力最强,显著
为主,峰面积占比分别为 44.58%、70.85%、25.79%,
强于阿卡波糖(P<0.05)。结合表 3 多糖的相对分子
多分散系数分别为 1.36、2.33、1.36。可以看出,4
质量分析,说明相对分子质量小的兰州百合多糖对
种多糖中 BLP-30 和 BLP-50 中相对分子质量大的多
α-淀粉酶的抑制能力更强,即多糖对 α-淀粉酶的抑
糖较多,而 BLP-70 和 BLP-80 中相对分子质量小的
制能力强 弱顺序为 BLP-70>BLP-80> 阿卡波糖
多糖较多。随着乙醇体积分数的不断增大,4 种多
>BLP-30>BLP-50。
糖的相对分子质量由 BLP-30-1 的 625 kDa 逐渐减小
至 BLP-70-4 的 2.45 kDa,相对分子质量小的多糖不
断增加。这可能是由于高体积分数的乙醇更有利于
相对分子质量小的多糖沉淀 [20] 。BLP-70-4 的分散系
数相对较大,原因可能是这部分多糖与蛋白的结合
较为紧密,受到蛋白残基的影响相对分子质量分布较
宽 [21] 。由上述结果可知,乙醇体积分数对兰州百合
多糖的相对分子质量分布有重要影响。
2.5 体外降血糖活性测定
4 种兰州百合多糖对 α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶
的抑制率和半抑制质量浓度(IC 50 )如图 4、图 5 和 注:**表示与阿卡波糖之间有极显著差异(P<0.01);*表示与
阿卡波糖之间有显著差异(P<0.05)。
表 4 所示。
图 4 4 种多糖对 α-淀粉酶的抑制率
由图 4 可知,在 0.0625~4 g/L 质量浓度范围内, Fig. 4 Inhibition rate of 4 polysaccharides for α-amylase