Page 164 - 《精细化工）》2023年第10期
P. 164

·2242·                            精细化工   FINE CHEMICALS                                 第 40 卷

            清除能力，能够有效抑制油脂的氧化                  [9-11] 。黄酮类      粉末，密封放于干燥器内备用，精密称取 2.0 g 荷叶
            化合物在人体中代谢较快，适量补充可以减缓氧化                             粉末，按照固液比 1∶25（g∶mL）加入浓度为 0.9 mol/L
            应激对细胞造成的功能性损伤，预防疾病的发生。                             的[C 6 mim]BF 4 水溶液，在提取温度 70  ℃、超声功
            目前，国内对荷叶黄酮的提取方法主要有水提醇沉                             率 186 W 条件下进行超声提取 24 min，之后提取液
            法 [12-13] 、超声辅助提取法     [14] 、微波辅助提取法      [15] 、   在 3000 r/min 转速下离心 15 min，取上清液，旋蒸
            复合酶法     [16] 等。单一的提取方法普遍存在提取率低、                   浓缩，用体积分数 70%的乙醇将浓缩液定容至 50 mL，
            提取时间长、需要大量挥发性试剂等缺点。                                得荷叶黄酮样品溶液。
                 离子液体是一种新型的绿色溶剂，具有热稳定                          1.2.2   芦丁标准曲线绘制与荷叶黄酮提取率测定
            性好、萃取能力强、可重复利用等优点                   [17-18] ，可通        黄酮提取率的测定采用 NaNO 2 -Al(NO 3 ) 3 -NaOH
            过调整阴阳离子的组成使其自身的物理化学性质发                             比色法   [24] ，以芦丁为对照品。以吸光度（Y）为纵
            生变化，能够溶解植物细胞壁的纤维素，使活性成                             坐标、芦丁质量浓度（X，g/L）为横坐标绘制标准
                                                                                                   2
            分更快速地溶出。同时，离子液体与被提取物的基团                            曲线，得回归方程：Y=10.35X–0.0019, R =0.9989。
            产生分子间作用力，从而显著提高提取率                  [19] 。超声波      在 0.05~0.30 g/L 范围内线性关系良好。
            技术在天然产物的提取中已得到广泛的应用，与离                                 取一定量荷叶黄酮样品溶液，以无水乙醇为空
            子液体结合能够显著节省时间、减少离子液体使用                             白对照，在 510 nm 波长处测定吸光度，由标准回归
            量 [20] ，具有提取率高、提取时间短、生物活性好等                        方程得到荷叶黄酮质量浓度，按式（1）计算荷叶黄
            优点。目前，超声辅助离子液体提取已应用于沙棘                             酮提取率。
            叶黄酮    [21] 、艾草黄酮  [22] 、葛根黄酮  [23] 等的提取分离，                                 V
                                                                            提取率    /%      100         （1）
            且取得了较好的提取效果。表明超声波辅助离子液                                                      m
            体提取法是一种有效可行的方法，但在荷叶黄酮提                             式中：  为黄酮质量浓度，kg/L；V 为提取物体积，
            取中的应用鲜见报道。                                         mL；m 为荷叶干料质量，g。
                 本文采用超声波辅助离子液体的方法提取荷叶                          1.2.3   单因素实验
            黄酮，通过单因素分析法，筛选最佳的离子液体类                             1.2.3.1   离子液体类型选择
            型，并考察了固液比、离子液体浓度、超声功率、                                 在固液比 1∶25（g∶mL）、离子液体浓度 0.2 mol/L、
            超声时间、提取温度等因素对荷叶黄酮提取率的影                             提取温度 70  ℃、超声功率 100 W、超声时间 10 min
            响，应用响应面法优化提取工艺条件，并通过对                              条件下，考察了 1-丁基-3-甲基咪唑溴盐（[C 4mim]Br）、
            DPPH•和•OH 的清除能力、总还原力及抗油脂氧化                         1-己基-3-甲基咪唑溴盐（[C 6 mim]Br）、1-辛基-3-甲
            能力进行测定，探索荷叶黄酮的体外抗氧化活性，                             基咪唑溴盐（[C 8 mim]Br）、1-丁基-3-甲基咪唑四氟
            为荷叶资源的综合开发利用提供理论参考。                                硼酸盐（[C 4 mim]BF 4 ）、[C 6 mim]BF 4 、1-辛基-3-甲基
                                                               咪唑四氟硼酸盐（[C 8 mim]BF 4 ）、1-丁基-3-甲基咪唑
            1   实验部分
                                                               六氟硼酸盐（[C 4 mim]BF 6 ）、1-己基-3-甲基咪唑六氟
            1.1   试剂与仪器                                        硼酸盐（[C 6 mim]BF 6 ）和 1-辛基-3-甲基咪唑六氟硼
                 荷叶购于安徽滁州市百姓缘大药房，产地湖南；                         酸盐（[C 8 mim]BF 6 ）对荷叶黄酮提取率的影响。筛
            花生油、新鲜肥猪肉，市售；1,1-二苯基-2-三硝基                         选出最佳的离子液体类型作为提取溶剂。
            苯肼（DPPH）、•OH 清除能力检测试剂盒，北京索                         1.2.3.2   固液比对荷叶黄酮提取率的影响
            莱宝科技有限公司；芦丁标准品（153-18-4），上海                            固定[C 6 mim]BF 4 为提取溶剂，设定离子液体浓
            源叶生物科技有限公司；1-己基-3-甲基咪唑四氟硼                          度 0.2 mol/L、提取温度 70  ℃、超声功率 100 W、
            酸盐（[C 6 mim]BF 4 ），分析纯，上海阿拉丁生化科技                   超声时间 10 min，考察不同固液比〔1∶15、1∶20、
            股份有限公司；其他试剂均为市售分析纯。                                1∶25、1∶30、1∶35（g∶mL）〕对荷叶黄酮提取
                 722 紫外分光光度计，上海上分仪器有限公司；                       率的影响。选择最佳的固液比进行下一步实验。
            HH-S 型水浴锅，巩义市英裕华仪器厂；微波超声波                          1.2.3.3   离子液体浓度对黄酮提取率的影响
            组合萃取仪，上海比朗仪器制造有限公司；BSM-120                             固定[C 6 mim]BF 4 为提取溶剂，设定固液比 1∶
            电子分析天平，上海卓精电子科技有限公司。                               25（g∶mL）、提取温度 70  ℃、超声功率 100 W、
            1.2   方法                                           超声时间 10 min，考察不同浓度（0.2、0.4、0.6、
            1.2.1   荷叶黄酮提取                                     0.8、1.0、1.2 mol/L）的离子液体对荷叶黄酮提取率
                 荷叶在 50  ℃下干燥，粉碎过 60 目筛得到荷叶                    的影响。选择最佳的离子液体浓度进行下一步实验。
   159   160   161   162   163   164   165   166   167   168   169