Page 134 - 《精细化工》2023年第11期
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·2446·                            精细化工   FINE CHEMICALS                                 第 40 卷

                 在化妆品中添加防腐剂是为了在生产、包装、                          技有限公司，其中 Shigella、S. typhimurium 用牛肉
            储存，尤其是使用过程中，抑制微生物繁殖，防止                             膏蛋白胨 培 养基培养 ， E. coli 、 S. aureus 、 L.
                               [1]
            产品变质或产生毒素 。市场上大多数化妆品中使                             monocytogenes、P. aeruginosa 用 Luria-Bertani 肉汤
            用的防腐剂主要是苯氧乙醇、羟基苯甲酸酯类、苯甲                            （LB）培养基培养；牛肉浸膏、蛋白胨、氯化钠、
            酸及其盐类和酯类等          [2-3] 。尽管在化妆品中防腐剂添              琼脂、酵母提取物、胰蛋白胨，生化试剂，上海生
            加的浓度很低，但研究表明，化妆品中的这些防腐                             工生物科技有限公司；牛肉膏蛋白胨培养基成分（均
            剂可能会对人类健康造成风险，如皮肤刺激、炎症                             为质量分数）：牛肉浸膏 0.3%，蛋白胨 1%，氯化钠
            反应和过敏性反应等          [4-5] 。因此，很多合成防腐剂已              0.5%，琼脂 1.5%（仅固体培养基添加），pH 7.0~7.2；
            被禁止在化妆品中大量使用。人们对具有抗菌活性但                            LB 培养基成分（均为质量分数）：酵母提取物 0.5%，
            不含合成防腐剂的天然化合物的需求日益增多                    [6-7] 。    胰蛋白胨 1%，氯化钠 1%，琼脂 1.5%（仅固体培养
                 微生物发酵的化学副产物因其有益的生理作用                          基添加），pH 7.0~7.2。
            受到人们的广泛关注          [8-9] 。研究表明，使用发酵产物                  2,2-联苯基-1-苦基肼基（DPPH，质量分数为
            对多种皮肤状况显示出积极作用               [10] ，如特应性皮炎、         96%）、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐
            痤疮、烧伤和疤痕         [11] 。帖航等 [12] 发现，表皮葡萄球           （ABTS，质量分数为 98%）、3-氧代-2-苯基-4,4,5,5-
            菌发酵提取物对皮肤的屏障具有修复作用，能有效                             四甲基咪唑啉-1-氧（PTIO，质量分数为 98%）、角
            地提高受损屏障中丝聚蛋白和兜甲蛋白含量。KIM                            鲨烷（质量分数为 98%）、异十六烷（质量分数为
            等 [13] 将卷曲乳酸杆菌 MGB0015 提取物配制成水包                    98%）、1,2-戊二醇（质量分数为 98%）、PEG-26 甘
            油型乳液，在储存期间可抑制致病菌生长。据                               油醚（质量分数为 98%）、甘油（质量分数为 99%）、
            MAJEED 等   [14] 报道，微生物产生的乳酸菌素具有抗                   1,3-丁二醇（质量分数为 99%）、聚乙二醇-32（质量
            菌作用，在临床研究中已对其抗痤疮的功效进行评                             分数为 99%），上海阿拉丁生化科技股份有限公司；
            估，并成功注册化妆品条例。芽孢杆菌是一类好氧                             PEG-10/15 交联聚合物/聚二甲基硅氧烷（质量分数
            或兼性厌氧菌，能产生多种抗菌物质和抗氧化物质，                            为 99%），上海轻工业研究所有限公司；聚二甲基硅
            包括细菌素      [15] 、超氧化物、羟基自由基、多肽类以                   氧烷、聚二甲基硅油、聚甲基硅倍半氧烷（质量分
            及抗菌蛋白类等，具有广泛的应用价值                   [16] 。         数为 99%），黄山市强力化工有限公司；二硬脂基二
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                 虽然已有研究表明，微生物发酵提取物对人体                          甲基胺锂蒙脱石（Bentone 38CG，密度 1.7 g/cm ，
            皮肤有积极作用，但芽孢杆菌属发酵液提取物在化                             常温活化，水分含量＜3%），德谦（上海）化学有
            妆品中的应用研究较少，特别是人体皮肤的实际应                             限公司；双-PEG-18 甲基醚二甲基硅烷（DC2501，
            用仍处于起步阶段。本研究从芽孢杆菌 ZYCHH-01                         质量分数 99%），道康宁（美国）有机硅有限公司；
            发酵液中提取出活性物质，探究该提取物对多种致                             玫瑰精油（货号 TC2018），江西泰诚天然香料有限
            病菌的抗菌作用及抗氧化能力，以探索芽孢杆菌发                             公司；PEG-10 聚二甲基硅氧烷，黏度 900~2300 mPa·s
            酵提取物在化妆品领域的应用。测试了添加提取物                             （25  ℃），武汉欣欣佳丽生物科技有限公司；过氧
            面霜抑制微生物繁殖能力及与人体皮肤的相容性和                             化氢（质量分数为 50%）、无水乙醇（质量分数为
            安全性，为芽孢杆菌发酵产物在化妆品中应用提供                             95%），西陇化工股份有限公司；氨苄青霉素（质量
            理论依据，为开发与制备芽孢杆菌发酵成分相关的                             分数为 98%），武汉科斯坦生物科技有限公司；苯氧
            化妆品原料提供理论支撑。                                       乙醇（质量分数为 99%），山东优索化工科技有限公
                                                               司；戊二醛（质量分数为 50%），上海麦克林生化科
            1   实验部分
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            1.1   试剂与仪器                                        C（Vc，质量分数为 99%），上海生工生物科技股份
                 芽孢杆菌 ZYCHH-01 为本实验室发现的菌种                      有限公司；去离子水，杭州哇哈哈集团有限公司；
            （经 16S rRNA 基因序列测定为芽孢杆菌，已保存                        甲醇（质量分数为 99.8%），赛默飞世尔科技公司；
            在中国微生物保藏中心，保藏号为 CGMCC No.                          氦气（质量分数为 99.999%），法国液化空气集团。
            26758）；大肠埃希氏菌（E. coli）ATCC25922、金                      SPL-80 型生化培养箱，天津市莱玻特瑞仪器设
            黄色葡萄球菌（S. aureus）CMCC(B)26003、单核增                  备有限公司；FE28-Standard 型 pH 计，梅特勒-托利
            生李斯特菌（L. monocytogenes）ATCC14028、福氏                多仪器（上海）有限公司；UPR-11-10TN 型优普系
            志贺氏菌（Shigella）CMCC(B)51572、铜绿假单胞                   列超纯水机，四川优普超纯科技有限公司；FDU-
            菌（P. aeruginosa）ATCC9027 和鼠伤寒沙门氏菌（S.               1200 型冷冻干燥机，上海爱朗仪器有限公司；
            typhimurium）ATCC19430 为指示菌株，上海鲁维科                  Phenom ProX G6 型扫描电子显微镜，美国 Thermo
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