Page 174 - 《精细化工》2023年第12期

·2716· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 40 卷

香气化合物，接着用 3 倍体积的无水乙醇溶液将吸 表 1 电子鼻不同传感器响应的香气成分
附在 Amberlite XAD-2 树脂柱上的 GBVs 洗脱出来。 Table 1 Aroma types corresponding to different sensors of
electronic nose
收集无水乙醇洗脱部分液体，在 35 ℃、0.9 MPa 下
传感器 型号 响应香气成分
减压浓缩至干，然后加入 25 mL 柠檬酸-磷酸氢二钠
S 1 W1C 对芳香化合物敏感
缓冲液（0.1 mg/L，pH 5.0）溶解，再加入 100 mL
S 2 W5S 对氮氧化合物敏感
乙醚/戊烷溶剂（体积比 1∶1）分 3 次萃取，除去有
S 3 W3C 对氨和芳香族化合物敏感
机相残留的游离态香气化合物，剩下的水相（约 50 mL）
S 4 W6S 主要对氢化物敏感
[8]
即为 GBVs 。
S 5 W5C 对烯烃和芳香族化合物敏感
1.2.4 GBVs 的释放
S 6 W1S 对甲基类化合物敏感
[6]
（1）超声处理：参考 SUN 等 方法稍作调整。 S 7 W1W 对萜类和含硫化合物敏感
取 1.2.3 节得到的水相（20 mL）于 50 mL 顶空瓶中， S 8 W2S 对醇类、醛酮类化合物敏感
加入 8 mg β-D-葡萄糖苷酶，采用涡流混合 3 s，置 S 9 W2W 对芳香族化合物和有机硫化物敏感
于 40 ℃恒温水浴中 8 h 后，经超声处理 20 min（280 S 10 W3S 对烷烃敏感
W，50 ℃），得到酶解液，取样进行电子鼻和 GC-MS
分析，每个实验平行重复 3 次，实验结果取平均值。 （2）GC-MS 条件：参照文献[8]对 GBVs 进行
[8]
（2）酸法水解：参照陈亦欣等 的方法稍作调 鉴定。GC 条件：色谱柱为 HP-5MS 石英毛细管柱
整。取 1.2.3 节得到的水相（20 mL）于 50 mL 顶空 （60 m × 250 μm × 0.25 μm）；进样口温度 250 ℃；
瓶中，用浓度为 1 mol/L 的 HCl 调节溶液 pH=1.0， 升温程序为初始温度为40 ℃，保持2 min，以5 ℃/min
置于 40 ℃摇床中水解反应 4 d。待水解完毕，用浓 升至 180 ℃，保持 1 min，再以 10 ℃/min 升至 240 ℃，
度为 1 mol/L 的 NaOH 水溶液调节溶液 pH 至中性，得 保持 4 min；载气为氦气；流量为 1.0 mL/min；采用
到水解液，取样进行电子鼻和 GC-MS 分析，每个实 无分流模式进样；进样口温度为 250 ℃。MS 条件：
验平行重复 3 次。 采用 EI 电离源，温度 230 ℃，电子能量为 70 eV，四
[8]
（3）β-D-葡萄糖苷酶酶解：参照陈亦欣等 的 极杆温度 150 ℃，传输线温度为 250 ℃；采集为全
方法稍作调整。取 100 mg β-D-葡萄糖苷酶置于 50 mL 扫描模式，m/Z 采集范围为 30~550。利用 GC-MS
顶空瓶中，再加入 1.2.3 节得到的水相（20 mL）， 标准谱库对键合态香气化合物进行检索定性分析，
密封后于 38 ℃酶解 48 h，得到酶解液，取样进行 保留匹配度≥85 的结果。
电子鼻和 GC-MS 分析，每个实验平行重复 3 次。 1.2.7 香气成分的定性、定量分析
1.2.5 电子鼻测试 （1）定性方法：采用气相色谱-质谱联用仪对样
分别取经超声、酸解和酶解处理后的 20 mL 酶 品中的香气成分进行分析鉴定，采用 NIST 2011 谱
解液或水解液，常温下静置 5 min 后立刻进行电子 库检索并结合保留指数进行定性，以确定各种香气
鼻检测，利用电子鼻自带的 Win Muster 软件对数据 成分的化学成分。
进行主成分分析（PCA）和传感器区别贡献率分析 （2）定量方法：采用内标法进行定量分析，通
（LoA）。电子鼻检测参数设置为：预进样时间 5 s， 过待测样品中香气成分特征离子峰面积（基峰）与
自动归零时间 5 s，采样时间 60 s，清洗时间 90 s， 内标物（环己酮）峰面积，按下式计算待测样品中
[8]
内部空气流量 0.3 L/min，进样流量 0.3 L/min [13] 。电 香气成分的含量（μg/L） 。
子鼻不同传感器响应的香气成分如表 1 所示。 香气成分峰面积 内标物质量
香气成分含量  （1）
1.2.6 GC-MS 测试 内标物峰面积 待测样品体积
（1）固相微萃取：在 50 mL 顶空瓶中，分别加入 式中：内标物质量单位为 μg ；待测样品体积单位为 L。
经超声、酸解和酶解处理后的 10 mL 酶解液或水解液、 1.2.8 香气活度值（OAV）的计算
50 μL 环己酮（以无水乙醇为溶剂，质量浓度为 0.946 g/L） 按下式计算 OAV：
内标物、7.2 g NaCl 和磁力搅拌子。将顶空瓶置于 40 ℃ 
OAV  （2）
水浴中平衡 30 min，经老化后〔老化温度 270 ℃，载 OT
气压力 3 PSI（20.68 kPa），老化时间 60 min〕的 50/30 μm 式中： 为待测样品中香气成分的含量，μg/L；OT
DVB/CAR/ PMDS 萃取头插入顶空瓶中，并推出纤维吸 为待测样品中香气成分在水中的气味阈值，μg/L。
附头，使其距离被吸附物表面 0.5 mm，静置吸附 30 min 1.3 数据分析
后，将吸附头收回针管后拔出，立即进样，在气相色谱 所有数据采用平均值±标准偏差表示，采用峰面
仪进样口保持 5 min 解吸。 积归一化法计算香气物质的相对含量。采用 SPSS