Page 170 - 《精细化工》2023年第12期

·2712· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 40 卷

黄酮中所含成分的相对含量有差异。因此，后续可 胞膜上 [20-21] 。抗菌物质作用后可能导致细胞膜通透
针对桂花黄酮成分的抑菌效果展开研究。 性改变，甚至细胞破裂，从而导致细胞内容物泄漏，
因此，可通过测定溶液的电导率评估质膜的通透性。
表 7 不同品种桂花黄酮的 MIC 值及对应抑菌率
Table 7 MIC values and corresponding antibacterial rate 如图 3a 所示，随着时间的推移，各组上清液的电导
of different varieties of flavonoid of O. fragrans 率逐渐增大，但对照组（CK）电导率在测定的 24 h
品种 MIC/(g/L) 抑菌率/% 内均保持相对较低水平。用不同品种桂花黄酮处理
金桂 1.50 54.41±1.27 c 过的溶液电导率在前 6 h 呈明显的增加趋势，并在
d
银桂 3.00 51.00±0.87 6~24 h 内保持较慢的增加趋势。在测定的 24 h 内，
d
丹桂 1.50 50.29±1.07 金桂和丹桂之间没有显著性差异；处理 9 h 内，四
b
四季桂 3.00 59.81±1.28 季桂和银桂之间没有显著性差异。对电导率的影响
氟康唑 < 0.062 75.92±1.51 a 由大到小依次是金桂>丹桂>四季桂>银桂。结果表
明，在桂花黄酮作用后，提高了菌体细胞膜的通透
2.5 桂花黄酮对白色念珠菌细胞膜的损伤效果
性，细胞内核酸、蛋白和金属离子等组分可能发生
按照 1.3.3 节进行实验，不同品种桂花黄酮对
泄漏，导致菌体死亡，因此，进一步测定细胞内核
C. albicans 细胞膜的损伤效果如图 3 所示。 酸和蛋白的泄漏评价细胞膜损伤程度。

利用核酸在 260 nm 处的吸收峰和蛋白与 BCA
试剂结合后在 562 nm 处的吸收峰来评价蛋白和核
酸的泄漏情况，结果如图 3b 和图 3c 所示。可以看
出，在桂花黄酮处理后 6 h 内，核酸和蛋白泄漏量
相比于对照组显著增加；作用 24 h 时，对照组和实
验组最高的 OD 260 分别为 0.132±0.004 和 0.330±
0.026，蛋白泄漏量分别为(276.968±4.01) μg/mL 和
(634.863±8.125) μg/mL，其变化趋势与电导率的变
化趋势相似。以上结果表明，桂花黄酮能诱导 C.
albicans 细胞膜损伤，导致细胞膜渗透性增加，促
进细胞内物质以 DNA 和 RNA 或细胞质蛋白的形式
通过细胞膜释放，银杏黄酮发挥抑菌效果时也有相
同的作用机制 [22] 。
2.6 桂花黄酮对白色念珠菌生物膜的体外抑制效果
按照 1.3.4 节进行实验，不同品种桂花黄酮对
C. albicans 生物膜的体外抑制效果如图 4 所示。

图 4 不同品种桂花黄酮对 C. albicans 生物膜的抑制作用
图 3 不同品种桂花黄酮对 C. albicans 细胞膜的损伤效果 Fig. 4 Inhibitory effects of different varieties of O.
Fig. 3 Damage effects of different varieties of O. fragrans fragrans flavonoids on C. albicans bioflims
flavonoids on C. albicans cell membrane
由于生物膜内部细胞能够受到膜的保护而降低
细胞膜的完整性对于维持细胞活性和胞内物质 或抵消宿主免疫反应和抗真菌药物的作用 [23] ，因此，
至关重要，大多数抗真菌物质的作用靶点都位于细 由菌丝嵌入形成的 C. albicans 生物膜是其发挥作用