Page 173 - 《精细化工》2023年第3期

第 3 期 王婷婷，等: 金银花多酚与红豆越橘乙醇提取物协同护肤 ·629·

仪器有限公司；UV-5500PC 紫外-可见分光光度计， Compound Discoverer 3.2 统计分析，得到准确的相对
上海元析仪器有限公司；Vanquish 型超高效液相色 分子质量及分子碎片信息，结合相关文献比对推断
谱联用 Q-Exactive Focus 四极杆-静电场轨道阱高分 红豆越橘乙醇提取物中重要活性成分的化学结构，
辨质谱仪（UPLC-TQ-MS），美国 Thermo Fisher 从而实现定性分析。
Scientific 公司。 1.2.5 保湿性能的测定
1.2 实验方法 参考文献[21]略作修改，将样品与阳性对照品
1.2.1 金银花多酚的提取与纯化 质量分数 99%甘油分别配制为 2 g/L 的水溶液，取
金银花粉碎后过 60 目筛，按料液比 1∶13.5 700 μL 涂抹于贴在玻璃片上的 3M 胶带上，与碳酸
(g∶mL)加入体积分数为 63%的乙醇水溶液中，超声 钾饱和水溶液一同放入干燥器，使湿度保持在 43%；
提取 21 min，抽滤，离心，减压浓缩，35 ℃恒温干 或与硫酸铵饱和水溶液一同放入干燥器，使湿度保持
燥 24 h，得金银花多酚粗提物。将其配成质量浓度 在 81%，每 1 h 称 1 次重，连续称 6 h。空白对照为
为 4.5 g/L、pH=4 的水溶液，上样 NKA-9 大孔树脂 蒸馏水，按式（2）计算保湿率：
柱，用体积分数 50%的乙醇水溶液洗脱，洗脱流速 保湿率 /%= M  M 0  100 （2）
2
3 mL/min，减压浓缩，35 ℃恒温干燥 24 h，得金银 M  M 0
1
花多酚提取物 [20] 。 式中：M 0 为玻璃片质量，g；M 1 为刚加样后玻璃片
1.2.2 红豆越橘乙醇提取物的制备 质量，g；M 2 为放置 1~6 h 后玻璃片质量，g。
按料液比 1∶20 (g∶mL)将红豆越橘加入体积 1.2.6 防晒性能的测定
分数为 95%的乙醇水溶液中，高剪切分散乳化机 用体积分数 50%的乙醇水溶液将样品配制为
4
1.8×10 r/min 匀浆处理 90 s，抽滤，减压浓缩，35 ℃ 1 g/L 的溶液，用紫外-可见分光光度计测定在中波
恒温干燥 24 h，得红豆越橘乙醇提取物。 紫外线（UVB）（290~320 nm）内的吸光度，用体
1.2.3 金银花多酚含量的测定 积分数 50%的乙醇水溶液调零。以常用有效防晒物
取 1、2、3、4、5 mg/L 没食子酸标准储备液各 质芦丁标准品为阳性对照 [22] ，并按式（3）计算日光
1 mL 于 10 mL 具塞试管中，蒸馏水作空白对照，加 防护系数（SPF 值） [23] ：
入体积分数 10% 的福林酚试剂 5 mL，反应 5 min 320
SPF=CF  EE  IA （3）
后加入质量分数 7.5%碳酸钠溶液 4 mL，摇匀，室 290  
温放置 60 min，用酶标仪在没食子酸最大吸收波长 式中：CF 为校正因子（本文取 10）；I λ 为太阳光谱
765 nm 处读取吸光度。绘制以没食子酸为标准品的 强度，W/m ；EE λ 为测定波长 λ 下辐射的红斑效应；
2
多酚标准曲线：y = 0.0118x + 0.0071 (y 为 765 nm 下 A λ 为在波长 λ 下的吸光度。EE λ ×I λ 为常量，280~
2
的吸光值；x 为金银花多酚的质量浓度，mg/L；R = 320 nm 下，EE λ ×I λ 值见表 1。
0.9994)。取适量金银花粗提物溶于蒸馏水中，根据
上述实验方法及标准曲线可计算金银花粗提物中金 表 1 SPF 计算规范系数常量
Table 1 Normalized coefficient constant used in the calculation
银花多酚的质量浓度(mg/L)。按式（1）计算每克金 of SPF
银花粗提物中金银花多酚的含量： 波长/nm EE λ×I λ
  f
Q  c （1） 290 0.0150
1000  s 295 0.0817
式中：Q 为每克金银花粗提物中金银花多酚的含量， 300 0.2874
mg/g；  为金银花多酚的质量浓度，mg/L；f 为金 305 0.3278
c
银花粗提物水溶液的稀释倍数； 为金银花粗提物 310 0.1864
s
质量浓度，g/L。 315 0.0837
1.2.4 液相色谱-质谱分析 320 0.0180

对红豆越橘乙醇提取物采用 UPLC-TQ-MS 进
每间隔 10 nm 测定长波紫外线（UVA）（320~
行化合物鉴定分析。检测条件：25 ℃，Hyperil Gold
400 nm）的吸光度（A），芦丁为阳性对照 [24] ，按式
色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.9 μm），正向流动相：
（4）、（5）计算平均紫外吸收率和平均透光率 [25] ：
A—体积分数 0.1%甲酸水溶液，B—甲醇；反向流

动相：A—5 mmol/L 醋酸铵水溶液（pH=9，氨水调节）， 平均紫外吸收率 /%= 1 ( 平均透光率) 100 （4）
B—甲醇，梯度洗脱，流速为 0.35 mL/min。结果由 平均透光率 /%=10 2 A （5）