Page 149 - 《精细化工》2023年第6期
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第 6 期                 杨   欢，等:  硼碳氮纳米管的制备及靶向递送阿霉素的抗肿瘤性能                                 ·1299·


                                                               胞的 DOX 量减少，细胞死亡减少              [23] 。由图 5c、d
                                                               可见，随着药物质量浓度的增加以及与细胞共同孵
                                                               育时间的延长，FA-BCNNTs-DOX 表现出比 DOX 和
                                                               BCNNTs-DOX 更高的细胞增殖抑制能力。质量浓度
                                                               为 1600 μg/L 的 DOX、BCNNTs-DOX、FA-BCNNTs-
                                                               DOX 培养 48 h 后，MDA-MB-231 细胞活力分别降
                                                               至 26.22%、22.46%、12.12%；培养 72 h 后分别降
                                                               至 13.26%、12.77%、8.74%。结果表明，在 FA 受
                                                               体 介 导的内 吞 作用下 ， MDA-MB-231 细胞对
                                                               FA-BCNNTs-DOX 的摄取能力得到提高，进入细胞
                                                               后的 FA-BCNNTs-DOX 在酸性条件下释放 DOX，在
                                                               细胞核内逐步积累，产生优异的抗肿瘤效果                    [24] 。
                                                                   采用活/死试剂染色分别测试了 DOX、BCNNTs-
                                                               DOX 和 FA-BCNNTs-DOX 对 MDA-MB-231 细胞的
                                                               毒性，结果见图 6。由图 6 可以看出，加入相同质
                                                               量浓度（800 μg/L）DOX 孵育 48 h 后，MDA-MB-231
                                                               细胞出现了不同程度的死亡，相比于 DOX 和 BCNNTs-
                                                               DOX，经 FA-BCNNTs-DOX 孵育后，死细胞的比例

                                                               大幅度增加，仅有少量细胞存活。说明 FA-BCNNTs-
                         误差线表示标准偏差（n=3）
            图 5   不同质量浓度的 FA-BCNNTs 处理后 MDA-MB-231             DOX 能引起更多的细胞死亡，表现出优异的抗肿瘤
                  细胞活力（ a ）；不同质量浓度的 DOX 、                      效率。
                  BCNNTs-DOX 和 FA-BCNNTs-DOX 分别处理 24 h
                  （b）、48 h（c）、72 h（d）后 MDA-MB-231 细胞
                  活力
            Fig. 5    Viability of MDA-MB-231 cells treated with
                    different mass concentrations of FA-BCNNTs (a);
                    Viability of  MDA-MB-231 cells treated with
                    different mass concentrations of DOX, BCNNTs-
                    DOX and FA-BCNNTs-DOX for 24 h (b), 48 h (c),        绿色代表活细胞；红色代表死细胞
                    72 h (d)                                   图 6   分别与 DOX（a）、BCNNTs-DOX（b）、FA-BCNNTs-
                                                                    DOX（c）孵育后，MDA-MB-231 细胞的染色结果
                 由图 5a 可知，MDA-MB-231 细胞在质量浓度
                                                               Fig. 6    Staining results of MDA-MB-231 cells after incubation
            高达 200 mg/L 的 FA-BCNNTs 中孵育 72 h 后，其细                    with DOX (a), BCNNTs-DOX (b) and FA-BCNNTs-
            胞活力也没有明显的变化，表明 FA-BCNNTs 是一                              DOX (c)

            种安全的药物递送载体。                                        2.4   细胞摄取药物
                 图 5b~d 分别展示了在不同时间和质量浓度的                           采用全自动倒置微分干涉显微镜观察了 MDA-
            影响下，DOX、BCNNTs-DOX 和 FA-BCNNTs-DOX                 MB-231 细胞分别对 DOX、BCNNTs-DOX、FA-
            对 MDA-MB-231 细胞的毒性。结果表明，DOX、                       BCNNTs-DOX 3 种药物的摄取情况，结果如图 7 所
            BCNNTs-DOX 和 FA-BCNNTs-DOX 均能明显降低                  示。由图 7 可见，在与药物共同孵育 4 h 后，3 组细
            细胞活力，且表现出了时间和剂量依赖性。但在相                             胞的细胞核周围均出现了不同程度的红色荧光，表明
            同剂量的 DOX 作用下，DOX、BCNNTs-DOX 和                      DOX 在细胞内聚集。其中，DOX 孵育组的细胞仅
            FA-BCNNTs-DOX 对 MDA-MB-231 细胞却表现出不                 能观察到微弱的红色荧光，表明细胞对 DOX 的摄取
            同的毒性。由图 5b 可见，在孵育初始阶段，                             量很低。因为 DOX 是以被动扩散的方式进入细胞                   [25] ，
            BCNNTs-DOX 比 DOX 能够引起更多的细胞死亡，                      其中一些很容易被 P-糖蛋白排出，造成 DOX 的核积
            这可能是细胞对低质量浓度游离的 DOX 摄取量少                           累量低   [26] 。与 BCNNTs-DOX 孵育组相比，FA-BCNNTs-
            且会被快速排除到细胞外             [18] 。然而，FA-BCNNTs-        DOX 孵育组的细胞核内红色荧光更加明亮，表明细
            DOX 表现出了比 DOX 和 BCNNTs-DOX 更低的细                    胞对 FA-BCNNTs-DOX 的摄取量更高。由于 FA 配
            胞毒性，这是由于 DOX 与 FA 之间形成了额外的氢                        体的存在，在摄取过程中 FA-BCNNTs-DOX 能够与
            键，导致 DOX 释放需要一定的时间，使能作用于细                          MDA-MB-231 细胞膜上的 FA 受体特异性结合，通
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