Page 150 - 《精细化工》2023年第6期
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过受体介导的内吞作用，提高了细胞对 FA-BCNNTs- 的内吞作用对 FA-BCNNTs-DOX 进行摄取的。FA-
DOX 的摄取能力，显示出 FA-BCNNTs 具有靶向递 BCNNTs 能够将 DOX 靶向递送到 MDA-MB-231 细
送药物的能力，有望成为一种良好药物载体。 胞内，提高药物的递送效率，有效避免因 DOX 的非
选择性扩散引起的对正常细胞的损伤。
2.5 体外释放实验分析
测试了 BCNNTs-DOX 和 FA-BCNNTs-DOX 在
不同 pH 的 PBS 中释放情况，结果见图 9。pH 为 7.4
的缓冲溶液对应于正常组织中的 pH，而 pH 为 4.5
对应于癌细胞内溶酶体和内涵体中的 pH [27] 。由图 9
可见，BCNNTs-DOX 和 FA-BCNNTs-DOX 具有相似
的释放特性。在前 12 h，DOX 从 BCNNTs-DOX 和
FA-BCNNTs-DOX 中快速释放，随后 DOX 的释放速
率相对减缓。并且 DOX 的释放具有 pH 依赖性，在
图 7 细胞内 DOX、BCNNTs-DOX、FA-BCNNTs-DOX
中性条件下，DOX 的释放量较小；而在酸性条件下，
分布的荧光显微镜图像
Fig. 7 Fluorescence images of intracellular uptake of DOX, DOX 的释放量显著增加，这是由于在酸性条件下
BCNNTs-DOX and FA-BCNNTs-DOX DOX 分子上的氨基容易发生质子化，使 DOX 与
FA-BCNNTs、BCNNTs 之间发生疏水相互作用，从
为了进一步证实 MDA-MB-231 细胞对 FA-
而显著提高了 DOX 的释放速率 [25] 。此外，对 FA-
BCNNTs-DOX 的摄取是通过 FA 受体介导的，分别
BCNNTs-DOX 来说，在 pH=4.5 和 7.4 条件下释放
将不同浓度（0、10、20 μmol/L）的游离 FA 加入到
96 h 后，DOX 的累积释放率分别约为 66.04%和
MDA-MB-231 细胞中，先与细胞孵育 1 h，然后再
18.20% ，而 BCNNTs-DOX 则分 别为 57.38% 、
加入 FA-BCNNTs-DOX 一起孵育 4 h，采用全自动
11.71%。在相同 pH 下，FA-BCNNTs-DOX 的累积
倒置微分干涉显微镜观察细胞内 DOX 的含量，结果
释放率比 BCNNTs-DOX 大。在 FA-BCNNTs-DOX
见图 8。
中，FA 的羧基基团与 DOX 羟基基团之间存在氢键
+
的相互作用，但由于酸性溶液中 H 的竞争作用，该
氢键作用被明显削弱，导致更多 DOX 的释放 [24] 。
并且 DOX 在 FA-BCNNTs 上的负载量大于 BCNNTs，
在相同释放条件下，FA-BCNNTs-DOX 能够释放更多
的 DOX。因此，体外释放实验表明，FA-BCNNTs-
DOX 和 BCNNTs-DOX 均能在癌细胞内实现 DOX
的 pH 响应性释放，这有助于提高 DOX 的生物利用
度，减少其对正常细胞的损伤。
图 8 经 0、10、20 μmol/L 游离 FA 预处理后，MDA-MB-
231 细胞内摄取的 FA-BCNNTs-DOX 的荧光显微镜
图像
Fig. 8 Fluorescence images of the uptake of FA-BCNNTs-
DOX by MDA-MB-231 cells after pretreatment
with 0, 10, and 20 μmol/L of free FA
由图 8 可以看出，采用游离 FA 预处理后，MDA-
MB-231 细胞核内红色荧光强度明显减弱，且随着游
离 FA 质量浓度的增加，荧光强度降低得更多。这
是因为，游离 FA 能够先与细胞表面过度表达的 FA 图 9 BCNNTs-DOX 和 FA-BCNNTs-DOX 分别在 pH=4.5
受体特异性结合，从而起到竞争性抑制作用，减弱 和 7.4 的 PBS 中 DOX 累积释放率随时间的变化
Fig. 9 Change of cumulative rate of DOX released from
了细胞对 FA-BCNNTs-DOX 的摄取能力。该结果进 BCNNTs-DOX and FA-BCNNTs-DOX with time
一步证实 MDA-MB-231 细胞是通过叶酸受体介导 in PBS with pH 4.5 and 7.4, respectively
