Page 141 - 《精细化工》2023年第8期

第 8 期 张文谦，等: Cu(Ⅱ)配合物的制备、结构多样性及超氧化物歧化酶活性 ·1755·

说明 CP1~3 的维度越高，框架越稳定。 化速率常数（k cat ）= k NBT ·c(NBT)/IC 50 ，其中 k NBT =
5.94×10 L/(mol·s)，为 NBT 的二级速率常数。
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图 8 CP1~3 的 TGA 曲线
Fig. 8 TGA curves of CP1~3

2.6 SOD 活性分析
CP1~3 的 SOD 活性通过 NBT 光还原法测定 [31] 。
NBT 光还原法的过程为：（1）在光照下，激发态的
核黄素被甲硫氨酸还原成半醌；（2）半醌提供一个
2–
2–
电子，将 O 2 转变成为•O ；（3）•O 将 NBT 转化为
蓝色的甲臜。在测试过程中，如果加入的配合物具
2–
有 SOD 活性，那么就可以在不同程度上清除•O ，
从而导致甲臜的含量减少 [32] 。甲臜的含量越少，配
合物的 SOD 活性就越高。而甲臜在 560 nm 处有最 图 9 不同光照时间下不同浓度 CP1 溶液的吸光度（a）；
2–
不同浓度 CP1 溶液对•O 的抑制率（b）
大紫外光吸收，因此，甲臜的含量可通过紫外-可见
Fig. 9 Absorbance of CP1 solutions different concentrations
分光光谱仪测试 560 nm 处的吸光度进行监测。 at different illumination times (a); Inhibition rate of
2–
用 0.05 mol/L pH = 7.8 的磷酸盐缓冲溶液配制 •O by CP1 solutions with different concentrations (b)
–6
含有 3.4×10 mol/L 核黄素、0.01 mol/L 甲硫氨酸以
–5
及 4.6×10 mol/L NBT 的混合溶液作为空白溶液。
用该空白溶液分别配制 0.10、0.25、0.50、1.00、5.00、
10.00、15.00 μmol/L 的 CP1~3 溶液。接下来，用光
强恒定的冷光灯照射空白溶液和不同浓度的 CP1~3
溶液，每照射 30 s 进行一次吸光度测试，每组溶液
2–
测量 600 s（为使配合物充分达到清除•O 的饱和状
态），并记录下吸光度数值。以光照时间为横坐标，
以吸光度值为纵坐标作图，可得出不同浓度 CPs 溶
液吸光度随光照时间变化的散点。对每条散点图进
行线性拟合，并计算出吸光度与光照时间的比值，
即斜率 k，结果见图 9、10、11。如图 9a、10a、11a
所示，随着 CP1~3 浓度的升高，直线斜率均逐渐减
2–
小，表明 CP1~3 清除•O 逐渐增多，从而导致甲臜
的含量逐渐减少。
根据公式：抑制率(η)/% = (1–k/k 0 ) × 100（k 0 为
空白溶液吸光度随光照时间变化的斜率），分别计
2–
算出不同浓度下 CP1~3 对•O 的抑制率。以 CP1~3
的浓度为横坐标，以不同浓度下的抑制率为纵坐标，
2–
可以得出 CP1~3 对•O 的抑制率曲线。通过这些曲 图 10 不同光照时间下不同浓度 CP2 溶液的吸光度（a）；
2–
线可以得出，NBT 光还原反应抑制率为 50%时 CPs 不同浓度 CP2 溶液对•O 的抑制率（b）
Fig. 10 Absorbance of CP2 solutions with different concentrations
的浓度，即 IC 50 值。SOD 活性可通过 IC 50 来衡量， at different illumination times (a); Inhibition rate of
2–
IC 50 越小，SOD 活性越优 [33-35] 。根据 IC 50，可计算催 •O by CP2 solutions with different concentrations (b)