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第 3 期                     雷   蕾,等:  复合酶协同超声提取藜麦皂苷及其抗氧化性                                  ·471·


            式中:A 0 为空白对照实验测定的吸光度,即未加样
            品的 DPPH·吸光度(DPPH·溶液+溶剂);A 1 为样品
            组测定的吸光度,即加入样品反应平衡后的吸光度
            (DPPH·溶液+样品溶液);A 2 为干扰组测定的吸光
            度,即样品本身的吸光度(样品溶液+溶剂)。

            2    结果与讨论

            2.1    单因素实验

            2.1.1    纤维素酶用量对藜麦皂苷提取率的影响
                                                                        图 2    果胶酶用量对提取率的影响
                 准确称取 2  g 藜麦种皮粉,控制酶解温度为
                                                               Fig. 2    Effect of dosage of pectinase on the extraction yield
            45 ℃,调节体系 pH 为 5.0,酶解时间为 0.5  h,选
            取纤维素酶用量(以藜麦种皮质量为基准,下同)                             2.1.3    酶配比对藜麦种皮皂苷提取率的影响
            分别为 0、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%,实验                      基于以上纤维素酶和果胶酶单独水解藜麦种皮
            方法同 1.2.4 节。以提取率为评价指标,考察了纤维                        提取皂苷的酶用量结果,并考虑到经济成本,准确
            素酶用量对提取率的影响,结果如图 1 所示。                             称取 2 g 藜麦种皮,控制总酶用量为 1.0%、1.5%,
                                                               酶解温度为 50 ℃,调节体系 pH 为 5.0,酶解时间
                                                               为 0.5 h,实验方法同 1.2.4 节。考察了酶配比 m(纤
                                                               维素酶)∶m(果胶酶)分别为 0∶1、1∶2、2∶3、
                                                               1∶1、3∶2、2∶1、1∶0 时对提取率的影响,其余
                                                               步骤同上。结果如图 3 所示。









                     图 1    纤维素酶用量对提取率的影响
             Fig. 1    Effect of dosage of cellulase on the extraction yield

                 如图 1 所示,加酶量为 0~1%时,藜麦皂苷提取
            率随加酶量的增加而上升。可能是因为酶用量较低

            时,酶能够全部参加反应,上升速度较快,在加酶                                        图 3    酶配比对提取率的影响
            量达到 1.0%时,提取率达到最大值,为 81.56%;                       Fig. 3    Effect of mass ratio of cellulase to pectinase on the
                                                                     extraction yield
            但加酶量高于 1.0%时,提取率下降。可能是由于过

            多的酶使浸提液的黏稠度增加,阻碍了皂苷的游离                                 如图 3 所示,总酶用量为 1.5%,酶配比为 3∶2
            扩散,不利于分离提取           [30-31] 。因此,选取最佳纤维            时,藜麦种皮皂苷的提取率最高。酶配比为 0∶1(只
            素酶用量为 1.0%。                                        添加果胶酶),总酶用量为 1.0%的提取率比 1.5%的
            2.1.2    果胶酶用量对藜麦种皮皂苷提取率的影响                        提取率低;酶配比为 1∶0(只添加纤维素酶),总
                 准确称取 2 g 藜麦种皮,控制酶解温度为 50 ℃,                   酶用量为 1.0%的提取率比 1.5%的提取率高。符合
            调节体系 pH 为 5.0,酶解时间为 1.0  h,实验方法同                   单酶单因素实验结果。主要是由于,藜麦种皮中含
            1.2.4 节。考察了果胶酶用量(以藜麦种皮质量为基                         有大量的纤维素以及果胶质,添加纤维素酶以及果
            准,下同)对提取率的影响,结果如图 2 所示。                            胶酶促进了皂苷向溶剂中的扩散。因此,选取最佳
                 如图 2 所示,随着果胶酶用量的增加,皂苷提                        总酶用量为 1.5%,m(纤维素酶)∶m(果胶酶)
            取率不断增加,说明酶催化反应速度与酶浓度呈正                             =3∶2 进行后续实验。
            相关性,尤其果胶酶用量在 1.0%以下时,增加较为                          2.1.4    酶解温度对藜麦种皮皂苷提取率的影响
            明显;酶用量在 1.5%时,达到最大值,为 82.2%。                           准确称取 2 g 藜麦种皮,控制总酶用量为 1.5%,
            从节约的角度考虑,选取最佳果胶酶用量为 1.5%。                          酶配比为 3∶2,调节体系 pH 为 5.0,酶解时间为
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