Page 54 - 精细化工2019年第9期
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·1782·                            精细化工   FINE CHEMICALS                                  第 36 卷

            公司）；FE20 型 pH 计〔梅特勒-托利多仪器（上海）                      激光粒度和 Zeta 电位分析仪对其性能进行了表征。
            有限公司〕；T10 basic ULTRA-TURRAX®小型分散                  热重测试中，分别称取 10 mg 左右 SA 和 OAD 于专
            机（德国 IKA 公司）；H1850 型台式离心机（湘仪                       用坩埚中，在 N 2 保护下，升温速度为 20  ℃/min，
            离心机仪器有限公司）；Scientz-10ND 型真空冷冻干                     测定范围 20~800  ℃，通过 449F3 型热重分析仪测
            燥机（宁波新芝生物科技股份有限公司）；Zetasizer                       定其热稳定性能。X 射线衍射测试中，先把 SA 和
            Nano  S90 型激光粒度和 Zeta 电位分析仪（英国                     OAD 研磨成粉末，在 40 kV 和 100 mA 的条件下，
            Malvern 公司）；449F3 型热重分析仪（德国 Netzsch                扫速为 0.02  (°)/s，扫描 2θ 范围为 5°~60°，通过 X
            公司）；F-7000 型分子荧光分光光度计、U-3900 型                     射线衍射仪分析其晶体结构和非晶体结构的变化。
            紫外分光光度计（日本 Hitachi 公司）；JEM2100 型                   采用分子荧光分光光度计测定其 FM，首先配制一
            200 kV 高分辨透射电子显微镜（日本 JOEL 公司）；                     系列梯度浓度的 SA 及 OAD 水溶液，其质量浓度范
                                                                         –4
            OCA15EC 光学接触角测量仪（德国 Dataphysics 公司）。               围为 5.0×10 ~4.0 g/L，分别转移到含有少量固体芘
            1.2   实验方法                                         的比色管中，水浴超声 60 min 3 次，静置 24 h，制
                 称取 4.0 g（22.73 mmol）AA 原料于 250 mL 烧           备含芘探针的胶束溶液。在室温下，荧光光谱激发
            杯中，加入 100 mL 蒸馏水，在磁力搅拌下使其分散，                       波长为 335 nm，激发和发射狭缝均为 2.5 nm，激发
            再逐滴滴入 26  mL  TBAOH 水溶液使聚合物完全溶                     电压为 700 V，扫描范围 340~600 nm，对其进行荧
            解，并控制 pH 在 7~10，接着用布氏漏斗进行抽滤，                       光扫描，以第一电子振动峰（373 nm 处）与第三电
            把不溶性颗粒杂质除去。将滤液装入截留相对分子                             子振动峰（384  nm 处）荧光强度的比值（I 1 /I 3 ）对
            质量为 3500 的透析袋中，在含有二次蒸馏水的大烧                         海藻酸衍生物胶束溶液浓度作图，即可得到其
            杯中透析 3 d，把未反应的小分子物质去除，进而冷                          CAC。与此同时，配制一系列梯度浓度的 OAD 水
            冻干燥得到淡黄色的海藻酸四丁基铵盐中间体                               溶液，其质量浓度范围为 5.0×10 ~4.0 g/L，采用光
                                                                                            –4
            （TBAA），其收率为 52.3%。同时，将海藻酸与氢                        学接触角测量仪通过悬滴法测其 SFT。最后，在
            氧化钠发生中和反应制备得到的 SA 作为实验参照                           60 ℃下配制 1.0 g/L 的 OAD 胶束溶液，采用激光粒
            组。                                                 度和 Zeta 电位分析仪分别测定 OAD 胶束溶液的水
                 将 0.67 g（2.55 mmol）TBAF 加入到盛有 67 mL           动力学粒径（d H ）和 Zeta 电位，并用 200  kV 高分
            DMF 的烧 杯中，待其溶解后，再加入 1.0  g                         辨透射电子显微镜观测 OAD 胶束结构的微观形貌。
            （2.16 mmol）干燥的 TBAA，在电动搅拌下使其充                      1.4    载药微纳米胶束的释药实验
            分溶解，直 至得到均相 透明溶液， 将 0.19  mL                       1.4.1    布洛芬标准曲线的绘制
            （1.08 mmol）1-溴辛烷滴加到此均相溶液中，于室                           准确称取 50 mg 布洛芬，用 PBS 溶解并定容于
            温下持续搅拌反应 24  h。反应结束后，向此反应液                         250 mL 容量瓶中，准确移取此标准液 0.25、0.50、
            中加入 33.5 mL NaCl 水溶液，其浓度为 2.5 mol/L，               1.00、1.50、2.00 mL 于比色管中，配制质量浓度分
            继续搅拌 2  h，使 TBAA 糖醛酸单体上未参加反应                       别为 5、10、20、30、40 mg/L 的布洛芬溶液，用紫
                             +
                   +
            的 TBA 置换为 Na 。最后，在此反应液中加入 5 倍                      外分光光度计在 222 nm 测其吸光度            [26-27] ，得到回归
            体积的乙酸乙酯，使反应产物沉淀出来，通过离心、                            方程 y=0.0464x+0.011，相关系数 R =0.9993。
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            醇洗、再离心后，将沉淀产物装入截留相对分子质                             1.4.2    布洛芬的缓释实验
            量为 3500 的透析袋中，于二次蒸馏水中透析 3 d 以                          将 1  mL 质量浓度为 12  g/L 的布洛芬乙醇溶液
            除去残留的小分子杂质，再经冷冻干燥即得到纯净                             与 5 mL 质量浓度为 6  g/L 的 OAD 溶液混合，高速
            的 OAD，其收率为 76.7%。采用 NaOH 标准溶液滴                     剪切，使其充分混匀形成载药微纳米胶束，载药微
            定 OAD，再用标准 HCl 溶液返滴定，依据皂化反应                        纳米胶束的包封率采用下式计算：
            过程中消耗的 NaOH 物质的量，计算出 OAD 的取                            包封率/%=（总药物质量－蒸馏水中游离的药物
            代度，具体方法参见文献[25-26]。                                质量）/总药物质量×100                            （1）
            1.3    OAD 的结构和性能表征                                    将此微纳米胶束水溶液装入截留相对分子质量
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                 通过 FTIR、HNMR 鉴定 OAD 的官能团和分子                   为 8000~14000 的透析袋中，然后，将其浸入到
            结构，将少量干燥的 OAD 和 SA 分别与 KBr 混合研                     100 mL PBS 溶液中，在 37  ℃下，每隔一段时间，
            磨，压片后，采用傅里叶变换红外光谱仪测定其                              把透析袋重新浸入到相同体积新配制的 PBS 溶液
            FTIR；以重水（D 2 O）为溶剂溶解聚合物于 5  mm                     中，可以避免由于药物释放而出现的饱和效应，并
            核磁管中，采用 400  MHz 核磁共振波谱仪测定其                        在每个时刻点取出此溶液 5 mL，用紫外分光光度计
            1 HNMR 谱图。通过 TGA、XRD、FM、SFT、TEM、                   在 222 nm 测吸光度，计算其质量浓度。各个时间段
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