Page 153 - 《精细化工》2022年第11期
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第 11 期 张喜峰,等: 两种方法提取琉璃苣叶多糖的理化性质及生理活性 ·2303·
1 mg/L LPS 溶液(阳性对照)和质量浓度为 100~
900 mg/L 琉璃苣叶多糖对 RAW246.7 细胞几乎没有
影响。细胞增殖率均>90%,表明在此质量浓度范围
可用于后续实验。
中性红是一种大分子,可通过内吞作用被巨噬
细胞吸收到细胞中,因此,可用于测定巨噬细胞的
吞噬作用。图 8b 表明,琉璃苣叶多糖可显著促进巨
噬细胞的吞噬能力,质量浓度为 700 mg/L BLP-2 可
最大限度地促进免疫细胞的吞噬能力。
a—琉璃苣叶多糖对 RAW264.7 的细胞毒性;b—巨噬细胞吞噬
中性红的能力;c—NO 的分泌;d—IL-6 的分泌;e—TNF-α 的
分泌
图 8 琉璃苣叶多糖的免疫活性
Fig. 8 Immune activities of polysaccharides from borage
leaves
巨噬细胞在通过表面受体蛋白吞噬入侵者的过
程中,可产生一些活性氮介质、白细胞介素物质和
肿瘤坏死因子,促进血小板的生成,刺激 B 淋巴细
胞的增殖,并促进骨髓巨核细胞的分化和成熟。因
此,将 RAW264.7 细胞分泌 NO、IL-6 和 TNF-α 用
于评价 BLP-1 和 BLP-2 的免疫调节活性。结果表明,
具有较高相对分子质量 BLP-2 能显著促进免疫细胞
分泌 NO(图 8c)。圆柏多糖已证实通过诱导 NO 合
酶直接刺激 NO 的产生,并通过调节单核细胞/巨噬
细胞的免疫功能诱导巨噬细胞分泌炎症和抗炎细胞
因子(IL-10) [27] 。
除质量浓度为 100 mg/L BLP-2 外,所有实验组
都对 IL-6 的分泌有显著影响(图 8d),质量浓度为
700 mg/L BLP-2 对免疫细胞分泌 IL-6 的影响最大。
与 BLP-1 相比,BLP-2 在较高质量浓度范围内对
TNF-α 影响更大(图 8e)。多糖的免疫活性与结构
特性密切相关,如单糖和糖苷链的组成以及相对分
子质量等 [28-29] 。USOLTSEVA 等 [30] 研究表明,由 Glc、
Gal 和 Fuc 组成的蘑菇杂多糖对 HeLa 细胞系具有免
疫增强和细胞毒性作用。本研究结果与上述一致,
推测 BLP-2 较强的免疫增强作用可能与 Gal 和 Glc
的存在及其含量有关。
总之,与空白对照组相比,质量浓度为 100~
900 mg/L 的多糖对损坏巨噬细胞免疫活性物质的分
泌有一定的促进作用。BLP-1 和 BLP-2 在一定质量
浓度范围内的免疫活性呈剂量依赖性,可能与细胞
凋亡或高质量浓度多糖处理巨噬细胞的免疫调节有
关。与 LPS(阳性对照)组相比,在 RAW264.7 细
胞中,多糖对吞噬中性红和 IL-6 分泌的影响优于
NO 和 TNF-α 分泌。由此可见,多糖主要通过控制
免疫细胞分泌 IL-6 发挥免疫活性。