Page 94 - 《精细化工》2022年第5期
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·948· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 39 卷
A A MT-4 细胞悬液，加入 100 µL 含有测试药物的培养
I / % a c 100 （1）
A A c 液药物在 37 ℃、体积分数为 5%的 CO 2 培养箱中孵
b
式中：I 为抑制率，%；A a 为加 MT-4 细胞与吲哚席 育 5 d 后，每孔加入 30 μL 质量浓度 5 g/L MTT 磷酸
夫碱类化合物后的吸光度；A c 为对照组（指的是不 缓冲溶液（pH 7.4），置于 37 ℃、体积分数为 5%
加药物，但加入 HIV-1 感染细胞，其他的溶液培养 的 CO 2 培养箱中继续孵育 4 h，然后每孔加入 100 μL
基、MTT 溶液、DMSO）吸光度；A b 为空白组（指 DMSO 溶解。使用通用酶标仪在 540 nm 波长处测定
的是不加药物但加入未被 HIV-1 感染的 MT-4 细胞， 每孔的吸光度，计算被测药物在不同浓度下的细胞
其他的溶液培养基、MTT 溶液、DMSO）吸光度。 抑制率 [20-21] ，计算出 EC 50 ；同时，采用正常的 MT-4
同时，根据式（2）计算测试化合物对未感染病 细胞作为测试细胞株，测试出化合物对应的 CC 50 。
毒 MT-4 的细胞病变率 P：
A A 2 结果与讨论
P /% d s 100 （2）
A A s 吲哚类席夫碱化合物 1~34 对 HIV-1 抑制活性评
e
式中：P 为病变率，%；A d 为 MT-4 细胞与吲哚席夫
价见表 1。由表 1 可见，本研究所合成的 34 个目标
碱类化合物后的吸光度；A s 为空白组（指的是不加
化合物对 HIV-1 有良好的抑制活性，其 EC 50 均 <
药物及 MT-4 细胞，但加入其他的溶液培养基、MTT 10.26 μmol/L。通过构效关系研究发现，吲哚骨架上
溶液、DMSO）吸光度；A e 为对照组（指的是不加 取代基类型、取代基的位置（R 1 ）以及席夫碱单元
药物，但加入 MT-4 细胞，其他的溶液培养基、MTT 苯环上的取代基（R 2 ）对活性均有影响。例如：无
溶液、DMSO）吸光度。 取代的吲哚席夫碱 1（R 1 = H）的 EC 50 = 7.95 μmol/L，
最后根据不同药物浓度下的细胞抑制率 I 和细 但给电子基（Me）及（OMe）的引入使化合物 2~5
胞病变率 P，采用非线性回归模型绘制 S 型剂量效 及化合物 6~8 活性降低，其中，只有 OMe 在吲哚环
应曲线，用 OriginPro 软件计算出 EC 50 （半最大效 C7 位的化合物 9 抑制 HIV-1 稍微强于化合物 1；卤
素（F、Cl、Br）的取代使化合物 10~13、14~17、
应浓度，指能引起 50%最大效应的浓度）和 CC 50
（使 50%未感染细胞发生细胞病变的药物浓度)；两 18~21 的抑制活性增加，尤其是 Br 取代活性较化
者的比值为选择指数（SI = CC 50 /EC 50 ），表明化合 合物 1 提高了 1.8~16.7 倍，其中化合物 19 和 21 抑
物效果的安全范围。 制 HIV-1 的 EC 50 达到了 0.45 和 0.97 μmol/L；当化
1.3.2 实验方法 合物 1 用吸电子基氰基取代后，化合物 22~25 也能
4
取 50 μL 含有 1×10 个 MT-4 细胞悬液铺至 96 够提高活性，但总的来说仍然是 Br 取代的化合物
孔细胞培养板中，加入 20 µL 感染 HIV-1ⅢB 的 的抑制活性更强。
表 1 吲哚类席夫碱化合物的 HIV-1 抑制活性评价
Table 1 Evaluation of anti-HIV-1 activities of indole Schiff base compounds
化合物 EC 50/(μmol/L) CC 50/(μmol/L) SI 化合物 EC 50/(μmol/L) CC 50/(μmol/L) SI
1 7.95 145.67 18.3 19 0.45 130.64 290.3
2 8.66 135.86 15.7 20 1.91 127.88 67.0
3 9.32 129.44 13.9 21 0.97 128.93 132.9
4 8.18 > 150.00 > 18.3 22 1.78 63.52 35.7
5 10.26 129.65 12.6 23 0.83 49.43 59.6
6 9.27 145.28 15.7 24 1.34 72.48 54.1
7 8.43 133.42 15.8 25 2.27 68.86 30.3
8 8.08 > 150.00 > 18.5 26 1.37 129.65 94.6
9 7.76 > 150.00 > 19.3 27 0.14 145.28 1037.7
10 1.54 > 150.00 > 97.4 28 1.46 131.49 90.1
11 1.87 95.78 51.2 29 1.52 111.77 73.5
12 1.23 134.62 109.4 30 0.19 > 150.00 > 789.4
13 3.49 > 150.00 > 42.9 31 0.06 > 150.00 > 2500.0
14 4.64 144.37 31.1 32 0.24 140.68 586.2
15 5.32 138.92 26.1 33 4.89 > 150.00 > 30.6
16 4.15 130.58 31.5 34 3.67 116.54 31.7
17 6.78 138.74 20.5 DLV 0.06 72.56 1209.3
18 2.83 > 150.00 > 53.0 EFV 0.02 6.42 321.0
