Page 154 - 《精细化工》2023年第5期
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·1074·                            精细化工   FINE CHEMICALS                                 第 40 卷

                 黄花菜（Hemerocallis citrina Baroni）是一种草          杆菌，北京市植物资源研究开发重点实验室；总抗
                   [1]
            本植物 。黄花菜含有丰富的蛋白质、脂类、胡萝                             氧化能力检测试剂盒（ABTS 法）、活性氧自由基
            卜素、糖类以及丰富的微量元素。食用黄花菜不仅                             （ROS）检测试剂盒、胞内过氧化氢酶（CAT）检
            能提高皮肤的弹性和紧致度，防止老化，而且有助                             测试剂盒、TNF-α、IL-6 和 COX-2 ELISA 试剂盒、
            于保持皮肤白皙。黄花菜的优势在于：其花蕾及根                             过氧化氢酶检测试剂盒、Ⅰ型胶原蛋白（COL-Ⅰ）
            等部位中含有大量生物活性成分，例如：类黄酮类、                            酶联免疫检测试剂盒、CCK-8 试剂盒，上海碧云天
            生物碱类、皂苷等。黄花菜中黄酮类化合物是其重                             生物技术有限公司；HaCaT 细胞、B16 细胞，中国
            要有效成分之一,具有延缓衰老、抗氧化、清除自由                            医学科学院基础医学研究所细胞资源中心；DMEM
                     [2]
            基等功能 。黄花菜还可以表现出抗菌、抗炎、有                             培养基、胎牛血清、成纤维细胞生长添加剂、青霉
                                              [3]
            效改善睡眠等多方面的生物活性功能 ，而且其在                             素/链霉素、体积分数 0.05%的胰蛋白酶，美国 Gibco
            市场中易获取，原料廉价，成分简单无害。                                生命技术公司；去离子水，深圳市广川环保科技有
                 由于市场上的化妆品仅含有低比例黄花菜成分                          限公司；磷酸盐缓冲液（PBS），赛默飞世尔科技（中
                                                                                     ®
            并且有限的提取条件使其不能充分发挥黄花菜的功                             国）有限公司；EasyScript  One Step gDNA Removal
            效，因此，选用微生物发酵的方法制备黄花菜发酵                             and cDNA Synthesis SuperMix  反转录试 剂盒 、
                                                                       ®
            液。通过对发酵条件的控制、选择合适的菌种和发                             TransStart  Top Green qPCR SuperMix，北京全式金
            酵工艺可以大规模生产所需产品。发酵技术的优点                             生物技术有限公司；MRS 琼脂培养基、酵母浸出粉
                                    [4]
            在于无危险性，易操作性 。大量实验证明，经过                             胨葡萄糖培养基（YPD 培养基），广州市百菱生物
            发酵后的原料活性物含量增多，抗衰老性能增强，                             科技有限公司。
                                        [5]
            抗炎效果上升。例如：李慧文 通过体内外免疫功                                 Sigma 1-14 微型离心机，德国西格玛离心机有
            能调节实验证实，酵母发酵对于免疫功能活性有影                             限公司；DJW-5KVA 智能型交流净化稳压电源，北
                         [6]
            响。王冬冬等 发现，红酒酵母发酵得到的体积分                             京力能恒电电子科技有限公司；96 孔细胞培养板，
            数 1%的葡萄籽发酵液作用在 B16 细胞后，胞内黑                         赛默飞世尔科技（中国）有限公司；ABI7300 型荧
            色素相对含量降到 55.62%，说明发酵液能够抑制黑                         光定量聚合酶链式反应仪，美国应用生物系统公司。
                                              [7]
            色素的生成，具有美白功效。吴迪等 发现，相较                             1.2   方法
            于水提液，葛根发酵液有良好的抗氧化效果以及抗                             1.2.1   黄花菜水提液（S1）的制备
                                 [8]
            衰老的功效。刘平平等 发现，发酵后的仙人掌可                                 首先将黄花菜放入研磨机中研磨成粉末状，称
                                                               取黄花菜粉 3 g 与去离子水 297 g 加入培养瓶中，
            有效抑制炎性因子 IL-8 的表达，有良好的抗炎性。
                                                               121  ℃灭菌，4800 r/min 离心分离 30 min 后，再一
            不同的温度、料液比和时间对黄花菜发酵均有影响。
                     [9]
            张江宁等 以黄花菜发酵液的总糖、总酸、总多酚                             次在 121  ℃灭菌锅进行灭菌 30 min，得到黄花菜水
                                                               提液 240 g，得率为 80%。
            为评价指标，通过单因素实验考察 3 个因素对产品
                                                               1.2.2   植物乳杆菌发酵制备黄花菜发酵物（S2）
            品质的影响。在料液比（g∶mL）1∶16，温度为 37.5
                                                                  （1）挑取植物乳杆菌单菌落接入 MRS 琼脂培
            ℃、时间为 6.2 d 的条件下，黄花菜乳酸菌发酵液总
                                                               养基，于 28  ℃、180 r/min 条件下培养 48 h，得到
            酸实测值为 18.7 g/kg，总多酚实测值 83.4 mg/100
                                                               植物乳杆菌菌液。
            mL，与响应面预测值吻合。
                                                                  （2）将 2 g 植物乳杆菌菌液接种到发酵底物中
                 在以上实验基础上，本文使用植物乳杆菌和酿
                                                               （发酵底物是由 3 g 黄花菜粉与 295 g 去离子水配
            酒酵母菌发酵制备得到两种黄花菜发酵液，并对其
                                                               制），在 37  ℃，180 r/min 的摇床中培养 16 h 后，
            抗氧化性、抗炎性、美白性和安全性进行评价，以
                                                               取出，在 4800 r/min 离心分离 30 min，取上清液即
            期弥补当前黄花菜发酵液在化妆品领域研究的不
                                                               为植物乳杆菌发酵制备的黄花菜发酵物（S2）250 g，
            足，为开发与制备微生物发酵成分相关的化妆品的
                                                               得率为 83%。
            原料提供理论支撑。
                                                               1.2.3   酿酒酵母发酵制备黄花菜发酵物（S3）
            1   实验部分                                              （1）挑取酿酒酵母单菌落接入已配制完成的
                                                               YPD 培养基中，于 28  ℃、180 r/min 条件下培养 48 h，
            1.1    试剂与仪器                                       得到酿酒酵母菌液。
                 黄花菜，北京同仁堂股份有限公司；1,1-二苯基                          （2）将 10 g 酿酒酵母菌液与发酵底物（发酵底
            苦基苯肼（DPPH），美国 Sigma-Aldrich 公司；酿酒                  物是由 3 g 黄花菜粉与 287 g 去离子水配制）融合后，
            酵母，中国食品发酵工艺研究院有限公司；植物乳                             在 28  ℃，180 r/min 的摇床中培养 48 h 后，取出，
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