Page 185 - 《精细化工》2023年第5期

第 5 期 韩 柳，等: 2-溴-4'-羟基查尔酮-苯磺酸酯衍生物的合成及抗肿瘤活性 ·1105·

J = 15.5 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 2.5 Hz, 4H), 7.75 (dd, J = 的 DMEM 培养基）、药物处理组（药物浓度为 0.625、
8.0、1.2 Hz, 1H), 7.49 (td, J = 7.6、1.3 Hz, 1H), 7.40 1.25、2.5、5、10、20、40 μmol/L）、空白对照组（无
(td, J = 7.6、1.7 Hz, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 细胞、等量细胞 DMEM 培养基）。每组设 3 个平行
13
2.10 (s, 3H)。 CNMR (126 MHz, DMSO-d 6 )，δ：187.7, 孔，37 ℃，体积分数 5% CO 2 培养 48 h，每孔加入
169.4, 152.4, 145.1, 141.6, 136.0, 133.8, 133.3, 132.3, 10 µL 新鲜配制的含 5 g/L MTT 的 DMEM 培养基，
130.8(2C), 129.8(2C), 128.8, 128.2, 126.9, 125.5, 37 ℃ 继续培养 4 h。用 100 µL 三联液〔10 g 十二
124.6, 122.5(2C), 118.7(2C), 24.2。MS，m/Z：C 23 H 18 BrNO 5 S
烷基硫酸钠（SDS），0.1 mL 10 mol/L HCl，5 mL 异
+
[M+H] 理论值 500.01，测试值 500.04。
丁醇，用蒸馏水稀释至 100 mL〕溶解结晶，37 ℃ 孵
(E)-4-[3-(2-溴苯基)丙烯酰基]-苯基-2, 4-二氟苯
育 12 h。用酶标仪在 492 nm 处测定吸光度(A 492 ) [19] 。
磺酸酯(Ⅴu)：收率 65.2%，m.p. 109.4~110.6 ℃。
1 按式（1）计算药物对肿瘤细胞生长的抑制率：
HNMR (500 MHz, DMSO-d 6)，δ：8.25 ~ 8.16 (m, 3H),
7.99 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 7.96 ~ 7.87 (m, 2H), 7.80 肿瘤细胞生长抑制率/%=[A 492( 正常对照组 )–A 492( 加药组 )]/
(ddd, J = 11.6、9.3、2.5 Hz, 1H), 7.75 (dd, J = 8.0、 [A 492( 正常对照组 ) –A 492( 空白对照组 ) ]×100 （1）
利用 GraphPad Prism 8.0 软件进行数据统计分
1.2 Hz, 1H), 7.50 (td, J = 7.6、1.3 Hz, 1H), 7.44 ~ 7.30
13
(m, 4H)。 CNMR (126 MHz, DMSO-d 6 )，δ：187.7, 析，求出样品对细胞增殖的抑制效果达到细胞正常
165.8, 158.7, 151.9, 141.7, 136.4, 133.8, 133.5, 133.3, 增殖水平 50%时的药物浓度（IC 50 ）。
132.3, 131.0(2C), 128.8, 128.2, 125.5, 124.5, 122.2(2C),
118.8, 113.4, 107.1。MS，m/Z：C 21H 13BrF 2O 4S [M+H] + 2 结果与讨论
理论值 478.97，测试值 479.00。
采用经典实验方法合成 2-溴-4′-羟基查尔酮，室
(E)-4-[3-(2-溴苯基)丙烯酰基]-苯基-2, 6-二氯苯
温（25~30 ℃）、乙醇-水溶液为溶剂，氢氧化钠为
磺酸酯(Ⅴv)：收率 70.3%，m.p. 126.3~128.1 ℃。 催化剂，4-羟基苯乙酮与 2-溴苯甲醛经羟醛缩合反
1 HNMR (500 MHz, DMSO-d 6 )，δ：8.23 ~ 8.19 (m, 2H), 应得到Ⅲ。目标化合物Ⅴ的合成以干燥丙酮为溶剂、
8.16 (dd, J = 7.8、1.7 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 15.5 Hz, 无水碳酸钾为缚酸剂，经酯化反应得到产物，产率
1H), 7.94 (dd, J = 5.0、2.2 Hz, 3H), 7.90 (d, J = 15.6 Hz, 范围为 60.9%~80.3%。采用 HNMR、 CNMR、MS
1
13
1H), 7.72 (dd, J = 8.0、1.2 Hz, 1H), 7.48 (td, J = 7.5、 对目标化合物进行结构表征，在 HNMR 中 δ 7.99
1
1.3 Hz, 1H), 7.42 ~ 7.37 (m, 1H), 7.36 ~ 7.32 (m, 和 δ 7.92 附近的两个双二重峰（dd 峰）归属于目标
13
2H)。 CNMR (126 MHz, DMSO-d 6)，δ：187.7, 151.8, 化合物双键上的氢，其耦合常数 J = 15.5 Hz，双键
141.7, 136.5, 136.5, 134.4, 133.7, 133.5, 133.3, 132.7, 上氢的耦合常数大于 12 Hz，根据文献确认目标化
132.3, 131.3, 131.1(2C), 130.7, 128.8, 128.2, 125.5, [20]
124.6, 122.0(2C)。MS，m/Z：C 21 H 13 BrCl 2 O 4 S [M+H] + 合物双键为反式结构 。
体外抗肿瘤实验结果如表 1 所示。
理论值 510.91，测试值 511.00。
由表 1 可知，23 种目标化合物对 3 种肿瘤细胞
(E)-4-[3-(2-溴苯基)丙烯酰基]-苯基-3, 5-二三氟
均具有一定的体外增殖抑制作用。目标化合物Ⅴp
甲基苯磺酸酯(Ⅴw)：收率 72.1%，m.p. 76.7~78.3 ℃。
1 表现出最强的 A549 细胞增殖抑制活性，半抑制浓度
HNMR (500 MHz, DMSO-d 6 )，δ：8.71 (s, 1H), 8.51 (s,
2H), 8.28 ~ 8.15 (m, 3H), 7.99 (d, J = 15.5 Hz, 1H), （IC 50）= 7.53 μmol/L，优于阳性对照药 5-氟尿嘧啶
7.92 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.1 Hz, 1H), （IC 50 = 8.10 μmol/L）。目标化合物Ⅴt 表现出最强的
13
7.50 ~ 7.47 (m, 1H), 7.49 ~ 7.37 (m, 3H)。 CNMR K562 细胞增殖抑制活性（IC 50 = 4.47 μmol/L）；目标
(126 MHz, DMSO-d 6)，δ：187.7, 151.8, 141.8, 136.7, 化合物Ⅴd 不仅表现出最强的 Hela 细胞增殖抑制活
136.5, 133.8, 133.3, 132.3, 132.1, 131.8, 131.0(2C), 性（IC 50 = 4.53 μmol/L），比阳性对照药 5-氟尿嘧啶
129.4, 129.1, 128.8, 128.2, 125.5, 124.5, 123.3, （IC 50 = 13.50 μmol/L）强约 3 倍，而且目标化合物Ⅴ
122.6(2C), 121.1, 119.0。MS ，m/Z ：C 23 H 13BrF 6 O 4 S d 对 A549 细胞（IC 50 = 8.00 μmol/L）和 K562 细胞
+
[M+H] 理论值 578.96，测试值 579.03。 （IC 50 = 7.81 μmol/L）也表现出较强的增殖抑制活性。
1.3 抗肿瘤活性 苯环上 2 位取代基主要表现为给电子的共轭效
选用悬浮细胞（K562）、贴壁细胞（Hela 和 A549） 应，2 位取代化合物Ⅴa~Ⅴg 对 Hela 细胞的抗增殖抑
3 种细胞系对数生长期的细胞，用含体积分数 10% 制活性从大到小顺序为 2-NO 2 (Ⅴd)>2-F(Ⅴa)>2-CF 3 (Ⅴ
4
小牛血清的培养基配成 1×10 个/mL 的细胞悬液， e)> Cl(Ⅴb)>Br(Ⅴc)>2-OCF 3 (Ⅴf)、2-CH 3 (Ⅴg)，对于
将细胞悬液接种在96孔培养板中，每孔50 µL，37 ℃， A549 细胞的抗增 殖 抑 制 活 性 从 大 到 小 顺 序 为
体积分数 5% CO 2 培养 24 h，各组给药培养。实验 2-NO 2( Ⅴ d)>2-F( Ⅴ a)> 2-OCF 3 ( Ⅴ f)>2-Cl( Ⅴ
分为正常对照组（未经处理的细胞和含 1‰ DMSO b)>2-CH 3 (Ⅴg)、2-Br(Ⅴc)、2-CF 3 (Ⅴe)，对于 K562